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液相色譜儀在使用中產生氣泡該怎么處理?

點擊次數:2144 發布時間:2020-11-25
  液相色譜儀在使用中產生氣泡該怎么處理?
  液相色譜儀適于分離生物、醫學大分子和離子化合物,不穩定的天然產物,種類繁多的其它分子及不穩定化合物。
  液相色譜儀在使用中整個液路系統有兩個地方易產生氣泡!
  1、泵頭吸液白管。
  2、檢測口流通池。
  氣泡產生的原因:溫度上升,壓力下降!
  溫度上升或柱溫上升,當接近試劑沸點時,試劑汽化產生氣泡,試劑中已含微小氣泡,因加熱變大而產生氣泡。
  壓力下降產生氣泡,流動相中一直包含微小氣泡,無論聲過濾,均不能池底去掉它,那么當壓力下降時,微小氣泡將長大,且多個小氣泡易聚集成大氣泡,而影響正常實驗。
  下面分部位說明氣泡產生原因及解決辦法:
  一、泵頭及吸液白管。
  1、泵頭:泵頭是壓力變化劇烈的地方,也是易產生氣泡的地方,泵頭靠負壓而吸液,而負壓必然使流動相中的小氣泡長大,當泵腔變正壓時,已長大的氣泡未必能部變小流入后續液路,則泵腔內將積存氣泡,從而影響吸液晶度,鑒于此,泵頭上門設計了排氣閥,便于泵頭排氣,觀察柱壓穩定了說明泵頭排氣成功。
  2、吸液白管長氣泡。
  a、吸液白管接觸空氣部位漏氣,產生可見氣泡,吸液白管是常壓和負壓交臂變化部位,其漏表現為大氣進入白管內,而不易見到管內液體漏出。
  處理方法:更換白管。
  b、濾頭堵:濾頭堵使得液體流入濾頭的速度下降,泵制吸液而產生真空氣泡。
  判斷:拔掉濾頭不再長氣泡則是濾頭堵。
  處理:A、30%硝酸水液洗濾頭,20分鐘左右。
  B、水洗濾頭,注意換水多幾次。
  c、流動相汽化產生氣泡。
  尤其是夏天室溫,沸點低的試劑易汽化,比如:乙酸,氨水,石油醚等易于汽化。
  處理:聲,降室溫。
  二、檢測流通池長氣泡。
  流通池是易積存氣泡的地方,其對基線影響巨大,流動相流入色譜柱后,壓力越來越小,微小氣泡將逐漸長大,而流通池截面積遠大于鋼管面積,則氣泡在池內易長大,氣泡的特點是長大在無外壓的情況下,難縮小到鋼管內經以下流出流通池,所以它就存在了池內。
  處理方法:1、對于示差檢測器(示差檢測器池只能耐幾個公斤壓力),只能是反復沖洗斥資,舉廢液瓶靠廢液管內液柱給池加一個微小反壓,所以這就靠成了示差池子排氣困難些,但無它法。
  三、紫外檢測器池內氣泡排除,當基線亂,無規則時,應考慮池子排氣泡。
  1、反復調節反壓器壓力,直至基線穩定。
  2、手工排氣泡步驟。
  a、取下反壓器,接上備用鋼管。
  b 、泵吸液,檢測器調零。
  c、在現柱壓基礎上加一個50KG壓力上限保護,比如,現柱壓60KG,pmax設壓力上限110KG即可
  d、手堵廢液鋼管出液端,眼看泵柱壓上升,且同時看檢測器顯示屏上AV值的變化。
  如果池內有氣泡,則手堵廢液管,AN值將劇烈變化,當手松開后AV值再次大步上升,證明池內有氣泡但沒有排掉,當手堵和松開廢液管時,AV值基本不變時,證明排汽泡成功,再觀察基線將穩定。
  四、池內有氣泡,手堵廢液管,AV值劇烈變負的原因解釋,池內充滿空氣或液體時,光透過率均,但有汽泡時透過率低,手堵廢液管,池內氣泡變小,光透過率加大,AV值劇烈變負。

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